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  • 问题1:莱普生一体耳标的特点?

    (1)力学原理设计,打标轻松简单省力,一气呵成; (2)一体式结构、专利设计、防止脱落、可佩戴终身; (3)采用耳标进口TPU原材料,韧性极佳,防止动物撕咬、啃食; (4)抗紫外线、抗菌、不易刮擦、脆化、断裂、耐高温/低温、不受极端天气影响; (5)独特的手术切口,减小创口,有助愈合,上标安全快速,避免动物应急反应; (6)抗微生物,防止切口感染,伤口愈合快、无毒、无异味、无刺激、环保; (7)配用专用耳标钳,使用更方便;

    问题2:莱普生耳标专用记号笔有哪些,使用过程中注意事项?

    (1)莱普生耳标专用记号笔采用进口油墨,高渗透性,使用寿命长等特点。 (2)记号笔不用时请盖好笔帽,以防油墨挥发。配合莱普生耳标使用效果更佳。

    问题3:掉标率高的原因有哪些?

    (1)耳标质量原因,主副标结合力低; (2)原材料不合格(抗氧化能力差、衰老快); (3)佩戴耳标的方法不规范; (4)打标的位置不准确; (5)打标时没有消毒,高温环境蚊蝇叮咬引起炎症,导致掉标现象。

    问题4:降低掉标率的方法有哪些?

    (1)打标位置要精确(左右距耳尖2/3与距耳朵上部边缘1/3交叉点的耳骨中间); (2)打标时固定好牲畜头部,防止打标时对动物耳部创面过大也会导致掉标; (3)耳标佩戴最好对牲畜耳标及耳朵进行消毒处理,以降低掉标率; (4)尽量保证耳标及耳标钳的干净整洁,在佩戴处尽量远离肥料及污染源; (5)在更换耳标或耳标脱落时,请不要在之前使用过耳标的耳洞上佩戴耳标,这样会出现耳标摆动,或其他异物勾住耳标容易掉标; (6)夏季如果出现蚊蝇叮咬打标部位,可以考虑在耳朵局部使用杀虫剂; (7)任何可能勾住耳标的设备及异物尽可能从牧场移走。 (8)发现动物撕咬耳标现象应及时制止或对损害耳标及时更换; (9)牲畜尽量在左右耳朵上佩戴相同信息的耳标,防止因耳标脱落造成牲畜信息缺失; (10)正确使用配套的耳标钳。

    问题5:耳标钳的正确使用方法有哪些?

    (1)检查耳标钳及耳标钳上的耳标针是否完好,以保证正常使用; (2)在耳标钳完全张开的状态下,公母标完全固定在耳标钳上(公标的饰钉完全插入耳标钉),母标完全放于钳子正下方; (3)先测试合拢,以确认公母标的相对处都达成一条直线; (4)佩戴耳标位置(左右距耳尖2/3与距耳朵上部边缘1/3交叉点的耳骨中间) (5)佩戴耳标时请从动物耳朵的背面钉入公标; (6)当确定打标位置时迅速合拢耳标钳,确认公母标合拢时迅速放开耳标钳,如果耳标钳未弹开,可用手辅助弹开; (7)佩戴好耳标后,可用手把母标的最宽面拉向朝地面的方向,以确认公母标之间的间隙(不能夹的太紧导致耳骨变形或坏死)造成耳标脱落; (8)如果有毛发过长遮挡住耳标现象,应先把打耳标位置的毛发剪短后再打耳标,以便于阅读耳标上的信息。

    问题6:正确的打标位置推荐。

    佩戴猪耳标时: 耳标应置于耳朵中间或者比较厚的部分 如果佩戴电子耳标,含有电子线圈的辅标部分应该置于耳标内部 佩戴牛耳标时: 耳标应置于离牛头比较近的两个软骨中间 如果佩戴电子耳标,含有电子线圈的辅标部分应该置于耳标内部 佩戴羊耳标时: 耳标应置于离羊头比较近的两个软骨中间 如果佩戴电子耳标,含有电子线圈的辅标部分应该置于耳标内部

    问题7:耳标打不进去的原因及解决方法?

    (1)原因:操作过程,动作缓慢力度不够;耳标钳针偏粗,未完全进入内控;主标锥头未对准副标孔;耳标佩戴位置不合适 (2)方法:使用与内孔径相符的钳针,打标时主标锥头对准副标,选择牲畜耳朵相对较薄的位置佩戴耳标,操作过程动作迅速有力。

    问题8:主标锥颈侧弯、折断或碎标的原因及解决方法?

    主要是因为耳标钳针与主耳标孔径不相符,可以更换与耳标相配套的钳针进行解决

    问题9:打标结束后,耳标钳无法恢复原状的原因及解决方法?

    主要是因为耳标钳针偏粗与主标不搭配引起的,使用配套的合适的耳标钳针打标更容易。

    问题10:耳标钳针弯曲或折断的原因及解决方法?

    主要是因为打标操作过程钳针与牲畜耳朵不垂直产生偏角引起的,使用统一型号耳标专用钳和钳针进行解决。

    问题11:耳标钳针弯曲或折断的原因及解决方法?

    主要是因为打标操作过程钳针与牲畜耳朵不垂直产生偏角引起的,使用统一型号耳标专用钳和钳针进行解决。

    问题12:在打标过程中操作注意事项有哪些?

    (1)在操作过程中,应尽量减少牲畜应激,保证操作人员的人身安全。 (2)耳标钳在日常使用过程中应进行必要的维护和保养。 (3)在使用过程中,如耳钳针螺母松动,请及时拧紧。 (4)因耳标材质遇高温变软,请勿将耳标散放于露天、高温、暴晒的环境中,否则影响使用。

  • 1971EngvallPerlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assayELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。

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    方法类型和操作步骤

    ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。

    (一)双抗体夹心法

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    双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:

    1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。

    2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。

    3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。

    4)加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。

    根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。

    (二)双位点一步法

    在双抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反应时间,如应用高亲和力的单抗体,测定的敏感性和特异性也显著提高。单抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。

    在一步法测定中,应注意钩状效应(hookeffect),类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。

    (三)间接法测抗体

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    间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:

    1)将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。

    2)加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。

    3)加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人IgG抗体。

    4)加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。

    本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。

    (四)竞争法

     

    竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下:

    1)将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。

    2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。 

    3)加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原最多,故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中抗原含量越多。

    (五)捕获法测IgM抗体

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    血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在,后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗本多用捕获法,先将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下:

    1)将抗人IgM抗体连接在固相载体上,形成固相抗人IgM。洗涤。

    2)加入稀释的血清标本:保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。

    3)加入特异性抗原试剂:它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。

    4)加入针对特异性的酶标抗体:使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。

    5)加底物显色:如有颜色显示,则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在,是为阳性反应。

    (六)应用亲和素和生物素的ELISA

    亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉和素(strepavidin)。生物素(biotin)又称维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimideBNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合,虽不属免疫反应,但特异性强,亲和力大,两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置,可以连接更多的生物素化的分子,形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELISA偶联起来,就可大提高ELISA的敏感度。

    亲和素-生物素系统在ELISA中的应用有多种形式,可用于间接包被,亦可用于终反应放大。可以在固相上先预包被亲和素,原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合,通过亲和素-生物素反应而使生物素化的抗体或抗在相化。这种包被法不仅可增加吸附的抗体或抗原量,而且使其结合点充分暴露。另外,在常规ELISA中的酶标抗体也可用生物素化的抗体替代,然后连接亲和素-酶结合物,以放大反应信号。

    ELISA普遍用作非放射性同位素的成键化验在这种方法中通常标准配体是固定的通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体而且最初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量第二种抗体能识别抗体的末端在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应从而使溶液显色